dns试剂测所需的药品

dns试剂测所需的药品

S试剂配制需酒石酸钾钠、3,5二硝基水杨酸、

DNS试剂测所需的药品及相关内容

DNS试剂的成分与作用

DNS试剂全称为3,5二硝基水杨酸试剂,主要用于测定还原糖的含量,其主要成分及作用如下:

dns试剂测所需的药品

药品名称 用量(示例) 作用
3,5 二硝基水杨酸(DNS) 3克 与还原糖在沸水浴条件下发生显色反应,生成棕红色氨基化合物,该产物在540nm波长处有最大吸收峰,可用于定量测定还原糖含量。
氢氧化钠 262ml 2mol/L(约10.48克,按2mol/L氢氧化钠溶液密度近似计算) 提供碱性环境,促进DNS与还原糖的显色反应。
酒石酸钾钠 182克 作为掩蔽剂,可消除溶液中某些金属离子对反应的干扰,同时维持溶液的离子强度,保证反应的稳定性。
重苯酚 5克 增强显色反应的稳定性和灵敏度,有助于提高测定结果的准确性。
亚硫酸钠 5克 具有抗氧化作用,可防止DNS在加热过程中被氧化,保证试剂的稳定性和有效性。

DNS试剂的配制方法

(一)所需药品及仪器

  1. 药品:3,5 二硝基水杨酸、氢氧化钠、酒石酸钾钠、重苯酚、亚硫酸钠、蒸馏水。
  2. 仪器:电子天平、量筒、烧杯、玻璃棒、容量瓶、棕色瓶等。

(二)配制步骤

  1. 称取6.3克3,5 二硝基水杨酸,置于500毫升含有182克酒石酸钾钠的热水溶液中,搅拌溶解,注意热水温度不宜过高,一般控制在50℃左右,防止DNS分解。
  2. 逐渐加入262毫升2mol/L氢氧化钠溶液,边加边搅拌,使其充分混合,此过程应在通风橱中进行,因为氢氧化钠具有腐蚀性,且反应可能会产生少量热量。
  3. 再加入5克重苯酚和5克亚硫酸钠,继续搅拌直至完全溶解。
  4. 待溶液冷却至室温后,用蒸馏水定容至1000毫升。
  5. 将配制好的DNS试剂贮于棕色瓶中,放置暗处保存,以避光防氧化变质。

注意事项

(一)药品纯度

  1. 所使用的药品应保证一定的纯度,尤其是3,5 二硝基水杨酸,其纯度会影响显色反应的准确性和灵敏度,一般应选用分析纯试剂。
  2. 氢氧化钠容易吸潮和与空气中的二氧化碳反应,应密封保存,使用前检查其是否变质,若氢氧化钠表面出现潮解或结块现象,可能会影响试剂的配制和测定结果。

(二)配制过程

  1. 在配制过程中,应严格按照规定的用量和顺序添加药品,确保各成分的比例准确无误,氢氧化钠的加入速度要适中,避免局部浓度过高导致反应过于剧烈。
  2. 搅拌要充分,使药品完全溶解,以保证试剂的均匀性,但搅拌时要避免剧烈搅拌产生过多的气泡,以免影响试剂的稳定性。
  3. 配制过程中使用的蒸馏水应符合实验要求,水质不纯可能会引入杂质,干扰测定结果。

(三)保存条件

  1. DNS试剂应贮存在棕色瓶中,并放置在暗处,避免阳光直射,因为光照会加速DNS的分解,导致试剂失效。
  2. 试剂的保存温度不宜过高,一般在室温下保存即可,高温会促使试剂中的成分发生化学反应,影响试剂的性能。

相关问题与解答

(一)问题

  1. DNS试剂可以重复使用吗?
    • 解答:DNS试剂一般不建议重复使用,因为在测定过程中,样品中的还原糖与DNS发生了化学反应,试剂的成分和性质已经发生了变化,再次使用可能会导致测定结果不准确,而且可能会引入杂质,影响后续测定,每次测定时应使用新鲜配制的DNS试剂,以保证测定结果的可靠性。
  2. 如何判断DNS试剂是否失效?
    • 解答:可以从以下几个方面判断DNS试剂是否失效,观察试剂的颜色,如果试剂颜色明显变浅或发生变化,可能表示DNS已经分解或发生了其他化学反应,在使用失效的DNS试剂进行测定时,标准曲线的线性关系会变差,空白管的吸光度值也会发生异常变化,如果测定结果与实际样品的还原糖含量相差较大,且重复测定结果不一致,也可能是DNS试剂失效导致的。

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