DNS试剂是如何配制的,并且它在检测还原糖含量时的作用是什么?

DNS试剂是一种用于检测还原糖含量的化学试剂,广泛应用于生物化学实验。其配制方法多样,但基本原理和步骤大致相同。

DNS试剂配制标准

1、Ghose法

甲液:将6.9 g结晶苯酚溶于15.2 mL 10% NaOH溶液,蒸馏水稀释至69 mL,再加入6.9 g亚硫酸氢钠。

乙液:将6.9 g 3,5二硝基水杨酸溶于880 mL 1% NaOH溶液中。

混合:将甲乙两溶液混合即得黄色试剂,储于棕色瓶中放置710天后使用。

2、轻工业部标准

配方:称取3,5—二硝基水杨酸(化学纯) 10 g,置于约600 mL水中,逐渐加入氢氧化钠10 g,在50℃水浴中搅拌溶解,再依次加入酒石酸钾钠200 g、重蒸苯酚2 g和无水亚硫酸钠5 g,继续45℃加热,补加水300 mL,不断搅拌直至溶解,冷却后定容至1000 mL,过滤,贮存于棕色试剂瓶中。

3、农业部标准

配方:称取3,5二硝基水杨酸3.15 g,加水500 mL搅拌,逐步加入100 mL 0.2g/mL的氢氧化钠溶液,同时不断搅拌,直至溶液清澈透明(注意温度不超过48℃),再逐步加入四水酒石酸钾钠91.0 g、苯酚2.50 g和无水亚硫酸钠2.50 g,继续45℃水浴加热,同时补加水300 mL,不断搅拌直至溶解,停止加热,冷却后定容至1000 mL,用烧结玻璃过滤器过滤,取滤液,储存于棕色试剂瓶中,避光保存。

DNS试剂配制注意事项

1、温度控制:在配制过程中,溶液加热温度不宜超过50℃,否则会导致溶液颜色变黑或产生沉淀。

2、加料顺序:3,5二硝基水杨酸与NaOH的加入时间要很近,或者先加入NaOH,否则会产生难溶的沉淀,导致配制溶液失败。

3、安全操作:实验过程中要注意安全,避免接触碱液和DNS试剂对皮肤的伤害。

4、存储条件:DNS试剂应贮于棕色瓶中,室温保存,使用过程中尽量减少与空气接触。

相关问题与解答

问题1:DNS试剂的主要用途是什么?

答案:DNS试剂主要用于生化试验中测定物质中还原糖的含量,它也能用于生物质中半纤维素含量的测定。

问题2:DNS试剂配制过程中为什么要控制温度不超过50℃?

答案:如果溶液加热温度超过50℃,会导致溶液颜色变黑或产生沉淀,从而影响DNS试剂的质量和使用效果。

问题3:DNS试剂配制时为什么要使用棕色瓶进行存储?

答案:DNS试剂对光敏感,使用棕色瓶可以避光保存,防止试剂变质或失效。

希望以上内容能够帮助您更好地了解DNS试剂的配制方法及其注意事项,如有其他问题,欢迎随时提问。

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